资料摘要
课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、课题背景1、尿素的利用尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。2、细菌利用尿素的原因土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶3、课题目的①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌②统计每克土壤样品中究竟含有多
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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教学设计第二课时
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关键词:课题2 土壤中分�…教学设计第二课时
正文
课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
一、课题背景
1、尿素的利用
尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。
2、细菌利用尿素的原因
土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶
3、课题目的
①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌
②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌
二、研究思路
㈠.筛选菌株
1、实例:DNA多聚酶链式反应是一种在体外将少量DNA大量复制的技术,此项技术要求使用耐高温(930C)的DNA聚合酶
原因:因为热泉温度70~800C,淘汰了绝大多
数微生物只有Taq细菌被筛选出来。
启示:寻找目的菌种时要根据它对生存环境的
要求,到相应的环境中去寻找。
2、实验室中微生物的筛选原理:
人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。什么是选择性培养基?
3、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基:
KHPO
1.4g
24
2.1g
NaHPO
0.2g
MgSO7HO
葡萄糖
10.0g
尿素
1.0g
琼脂
15.0g
①
物理性质看此培养基属于哪类?
固体培养基
②
此培养基中哪些作为碳源、氮源?
碳源:葡萄糖、尿素
氮源:尿素
4、培养基选择分解尿素的微生物的原理
培养基的氮源为尿素,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。
㈡.统计菌落数目
㈢.设置对照
三、实验的具体操作
㈠.土壤取样
从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右,再取样,将样品装入事先准备好的信封中。
取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。
㈡.制备培养基:
制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。
㈣.取样涂布
◆实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。
㈤.微生物的培养与观察
思考:要将哪些培养皿进行培养?
培养不同微生物往往需要不同培养温度。
细菌:30~37℃培养1~2d
放线菌:25~28℃培养5~7d
霉菌:25~28℃的温度下培养3~4d。
在菌落计数时,每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果,以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
◆如果得到了2个或2个以上菌落数目在30——300的平板,则说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数,如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大,表明试验不精确,需要重新实验。
四、结果分析与评价
1.通过对照实验,若培养物有杂菌污染,菌落数偏高;若培养物混入其他氮源,则菌落形态多样,菌落数偏高,难以选择出分解尿素的微生物。
2.提示:选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相差悬殊,如相差较大,表示实验不精确。
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