复习与测试优秀教案内容

微生物的实验室培养(一) 一、培养基

1.概念：人们按照微生物对_____________的不同需求，配制出供其_____________的营养基质。

2.种类:按照物理性质划分，可分为________________和___________________,在液体培养基中加入凝固剂________后，可制成固体培养基; 按功能划分，可分为_____________和_____________。

3.成分

(1)主要成分：_________________________________。

(2)其他成分：还需要满足微生物生长对________、_____________以及________的要求。

(3)某些微生物生长还需要特殊的条件，填表完成培养下列微生物时所需要的特殊条件

培养的微生物

乳酸杆菌

霉菌

细菌

厌氧微生物

4.牛肉膏蛋白胨培养基

(1)牛肉膏蛋白胨培养基中提供碳源和氮源的物质各是什么？

(2)牛肉膏蛋白胨培养基中主要提供碳源和主要提供氮源的物质各是什么？

5.试根据微生物的同化作用类型将微生物分为？

6.试分析硝化细菌、固氮菌、绿色植物的碳源、氮源和能源分别是什么？

碳源

氮源

能源

需要满足的其他要求

培养基中添加___________ 将pH调至____________ 将pH调至_____________ 需要提供_______条件

硝化细菌

固氮菌

绿色植物

二、无菌技术

1.关键：_________________________________。

2.两种无菌技术的比较

比较项目

a._____________________ 较为______________的理化因素

b.__________________ _____________的理化因素

作用强度

作用程度

杀死物体表面或内部的______微生物

杀死物体内外的_______的微生物

芽孢和孢子

一般______杀灭

______杀灭

适用对象

操作空间、活体生物材料、操作者衣着和双手

①_______________ 操作工具、玻璃器皿、培养基等

常用方法

②_______________ ③_______________ ④_______________ ①_______________ ②_______________ ③_______________

3.消毒和灭菌的原理是什么？

4.培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是

__________、___________、__________、___________、___________、___________

5.无论是接种微生物还是制备培养基中的倒平板，为什么都要在酒精灯火焰附近进行？

微生物的实验室培养(二) 三、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基

1.成分______________________________________________。

2.制备步骤______________________________________________________________

①溶化过程中

操作

往烧杯中加入蛋白胨和氯化钠后用玻棒搅拌

搅拌的目的

_____________________________ 加入琼脂，加热使其熔化的过程中使用玻棒搅拌

_____________________________

②溶化之后，灭菌之前还应该_______________。

③灭菌时，培养基和培养皿分别如何灭菌？

④培养基灭菌后，需要冷却至50 ℃左右时，才能倒平板的原因是什么？你用什么办法来估计培养基的温度？

⑤倒平板时，为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？

⑥平板冷凝后将平板倒置的原因是什么？

⑦怎样判断制备的培养基是否合格、成功，是否受到污染？

四、纯化大肠杆菌

1.接种方法：________________和________________________。

(1)平板划线法

①原理：通过接种环在琼脂固体培养基表面______________的操作，将聚集的菌种逐步__________到培养基的表面。

②步骤

a.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？

b.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？

c.在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？

d..在做第二次划线以及其后的操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？

e.为何最后一次划线不能与第一次划线相连？

(2)稀释涂布平板法

①原理：将菌液进行一系列的_______________，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

②步骤

1.___________________ 2.___________________ a.不同稀释度的菌液一般涂布几个平板适宜？

b.如果不同稀释度的菌液接种后都不能得到单细胞菌落，说明什么？

C.为什么要将一个未接种的培养基和一个接种的培养基放在一起培养？未接种的培养基表面是否有菌落生长很关键。如果有菌落生长，说明了什么？

五、菌种保藏

1.菌种保藏的方法______________、____________ 2.两种方法的比较

比较项目

①_____________________ ②__________________ 适用范围

________使用的菌种

_________的菌种

培养基

_____________________ _________________ 保藏温度

_________ __________ 具体方法

接种到固体斜面培养基上→适宜温度下培养→冰箱中保藏

甘油瓶中装入甘油后灭菌→将菌液转移至甘油瓶中→混匀后冷冻箱中保存