课题3　血红蛋白的提取和分离教学实录与评析

专题5 DNA和蛋白质技术

课题3 《血红蛋白的提取和分离》教学设计

一、教学目标

（一）知识目标

1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白

2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理

（二）能力目标

体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求，注意按照操作提示进行相关步骤

（三）情感目标

初步形成科学的思维方式，发展科学素养和人文精神

二、教学重点和难点：

教学重点：（1）掌握《血红蛋白提取和分离》的基本过程和方法，细化过程

（2）凝胶色谱法的原理和方法

教学难点：样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填

三．教学过程设计：

教学内容

导入

基础知识

三、电泳

1．

概念：___________在电场的作用下发生迁移

1 教师活动

一.血红蛋白可以运输氧气，可见血红蛋白是生命中不可缺少的物质，如何提取和分离血红蛋白呢？

二、动画显示凝胶色谱法，小结

1、概念：据_____________的大小分离蛋白质的有效方法

2、凝胶：____________________ 3、原理：P65图5-13 大分子通过多孔凝胶颗粒的____，路程____移动___ 小分子通过多孔凝胶颗粒的____，路程____移动___

学生活动

听讲、思考，在老师的引导下回忆内容。

学生看书讨论，小组合作学习。

教学意图

激发学生的学习兴趣。通过设疑激发学生思考，便于新课的讲授。

讲练结合，巩固所学知识。

的过程

2．

分类：________电泳和________电泳

3. 原理：__________________________ 4. 决定蛋白质移动的原因：

_____________________________________

培养学生分析归纳的能力，落实本节课的能力目标。

。

培养学生应用所学知识的能力，巩固所学知识。

决定

蛋白质性质

电荷性质

电荷多少

分子形状

分子大小

运动方向

决定

运动速率

学生思考，回答

学生思考、分析、讨论作答

5.为测定蛋白质分子大小,常用_______________凝胶电泳

6. SDS的作用：______________________

练习：使用SDS-聚丙烯酰胺电泳过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于（ ）

实验操作

A 电荷的多少 B 分子的大小

C 肽链的多少 D 分子形状的差异

实验操作

样品处理和粗分离

1、蛋白质的提取和分离一般分为哪四个步骤？

2、本课题为什么选择哺乳动物的血液来分离血2

红蛋白？必须这样选择吗？

总结血液，血红蛋白的有关知识填写学案中相关内容。

3、视频展示蛋白质的样品处理以及初分离，引导学生理解

4、学生分小组的形式讨论学案，解决问题

小组讨论学习：

1．红细胞洗涤”环节的目的是？

2.采集的血样为什么要加入柠檬酸钠？

3.采集的血样在离心的时候为什么是“低速短时

”？

4.洗涤时为什么用的是生理盐水而不是蒸馏水？

5.搅拌的时候为什么强调“缓慢”？

6.为什么要强调多次洗涤？

7.洗涤到什么情况才算干净？

8.“血红蛋白的释放”环节的目的是？

9.在烧杯中加入蒸馏水和甲苯的目的是？

10.搅拌的时候为什么强调“充分搅拌”？

11“分离血红蛋白溶液”步骤的原理是什么？

12.离心后溶液分为4层，从上到下分别是何种物质？各有什么样的表观特征？

13过滤和分液漏斗分别发挥什么作用？

14.思考：如果高速离心后并未出现预期的分层现象，可能是什么原因？

15.粗分离利用的是什么技术？主要的目的是什么？为什么透析袋外面用的是磷酸缓冲液？如果在透析袋外面的缓冲溶液中加入双缩脲试剂或出现什么现象？

纯化：

（1）凝胶色谱柱的制作

（2）凝胶色谱柱的装填

3

学生思考并做初步分析，回答问题

学生思考并做初

通过小组合作方式学习知识，培养学生利用所学知识解决实际问题的能力。

引导学生自我评估所学知识掌握情况

以学生为主体，肯定学生的能模式结合：教师进行适当的引导，通过问题推进的办法提高学生质疑、假设、探究的能力，体现本节的能力目标。

步分析，回答问题

力，

探究、讨论

①凝胶装填时尽量______，降低凝胶颗粒间的空隙。

②装填凝胶柱时不得有______,因为____________________。

（3）样品加入与洗脱

A.分离(洗脱)过程中，如何根据红色区带移动情况，

判断分离效果? P70 B血红蛋白是有色蛋白，这一特点对你进行蛋白质的分离有什么意义？

纯度鉴定：

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

课堂小结

总结本节课知识点及联系，强调本节课的重点和难点。

构建知识网络

构建知识网络，形成知识体系

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