课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数优秀教案板书设计

课题:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(第二课时)

一、学习目标: 1.利用选择培养基分离细菌。 2.运用活菌计数法测定土壤中尿素细菌的数量。

二、教学过程：

阅读课本P23-P26,结合教材提供的资料分析回答下列问题。

一、实验设计包括哪些内容？

包括对_____________、所需______、_______、________和________，_______________以及______________等的综合考虑和安排。

二、分离土壤中分解尿素的细菌的实验操作步骤（有哪些？）

(第一组展示)1．土壤取样：从肥沃、湿润、______接近中性的土壤中取样。先铲去表层土__cm左右，再在距离地表___________cm处取样，将样品装入事先准备好的________中。

注意事项:取土样用的_________和盛土样的的信封在使用前都要_________。

（第二组展示）2．制备培养基：制备以尿素为唯一氮源的_______培养基和_______培养基。 步骤:________→______→____→_____→_____。

注意事项:倒平板时要冷却到______，且要在________旁进行。

（第三、四组展示）3.样品稀释：将10g_____加入盛有90 mL_______的锥形瓶中(体积为250mL)，充分摇匀，吸取________，转移至盛有的9ml_______的试管中，将土样以101，102，103…

依次等比稀释至107稀释度

注意事项：①应在________旁称取土样。

②在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在________旁进行

③分离不同的微生物采用不同的____________. 思考：为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？

（第五、六组展示）4.取样涂布：按照由__________稀释度的顺序分别吸取土样

进行平板涂布操作。每个稀释度下需要________个选择培养基和1个牛肉膏蛋白胨培养基。

注意事项：

①涂布器和移液管要保持_________。②如果得到了2个或2个以上菌落数目在____________的平板，则说明稀释操作比较成功，如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明________，需要___________。③实验时要对________作好标记。注明___________、____________、__________、_________等

（第七组展示）5.微生物的培养与观察

培养：不同微生物往往需要不同培养温度。

细菌：__________℃培养_______d ,放线菌：_________℃培养_______d 霉菌：____________℃的温度下培养_______d 观察：在相同的培养条件下，同种微生物表现出______菌落特征。包括：形状、大小、___________和__________。

（第八组展示）6．细菌的计数

在菌落计数时，每隔___h统计一次菌落数目。选取______时的记录作为结果. 三.结果分析与评价（第九组展示）

内容 现象 对照的培养皿中无菌落生长 有无杂菌污染的判断 培养物中菌落数偏高 菌落形态多样，菌落数偏高 选择培养基的筛选作用

结论

选择培养基具有筛选作用 操作成功 样品的稀释操作

重复组的结果

若选取同一种土样，统计结果应__________.

当堂检测

1.能够测定样品活菌数的方法是( ) A．稀释涂布平板法 B．直接计数法 C．重量法 D．比浊法

2.下列操作步骤顺序正确的是( ) ①土壤取样②称取10g土样，加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中③吸取0.1mL土壤溶液进行平板涂布④依次稀释至101、102、103 107稀释度

A.①→②→③→④B.①→③→②→④C.①→②→④→③D.①→④→②→③

3.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是( ) A.筛选出能分解尿素的细菌 B.对分离的菌种作进一步鉴定

C.作细菌的营养成分 D.如指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素

4.(2016·四川，10)图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程。请据图回答下列问题：

(1)图中选择培养基应以________为唯一氮源,鉴别培养基还需添加_______作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成______色。

(2)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1 mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为163、156、262、178和191。该过程采取的接种方法是____________ ，每克土壤样品中的细菌数量为____×108个；与血细胞计数板相比，此计数方法测得的细菌数目较_____。

5.(2015·浙江自选模块，17节选)某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂，对该酶菌株进行筛选，其流程如下图所示。

土样中的菌种筛选→菌株鉴定→优良菌株扩大培养→植酸酶提纯→植酸酶固定化→植酸酶特性分析

请回答下列问题：

(1)土壤悬液首先经80℃处理15分钟，其目的是筛选出________________。

(2)在无菌条件下，将经过处理的土壤悬液进行_______，然后涂布于含有植酸钠的固体培养基上。培养后观察到___________ (3)筛选获得的菌株经鉴定后，将优良菌株进行液体扩大培养。培养时需要振荡，其主要目的是__________。液体培养基与固体培养基相比，不含有的成分是_________________。