资料摘要
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、课前复习提问1.培养基?2.消毒和灭菌?3.牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备方法? 4.倒平板步骤?5.微生物接种最常用的方法及其步骤?6.选择培养基和鉴别培养基?二、三、新课1.筛选菌株(1)自然界中目的菌株筛选的依据是根据它对的要求,到相应的环境中去寻找。(2)实
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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数第一课时评课稿
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关键词:课题2 土壤中分�…第一课时评课稿
正文
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
一、课前复习提问
1.培养基?
2.消毒和灭菌?
3.牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备方法? 4.倒平板步骤?
5.微生物接种最常用的方法及其步骤?
6.选择培养基和鉴别培养基?
二、
三、新课
1.筛选菌株
(1)自然界中目的菌株筛选的依据是根据它对
的要求,到相应的环境中去寻找。
(2)实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于
生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时
或
其他微生物生长。
(3)选择培养基:在微生物学中,将允许
种类的微生物生长,同时
和
其他种类微生物生长的培养基,称作选择培养基。
2.统计菌落数目
(1)常用方法:
法。
(2)统计依据:当样品的
足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个
。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品大约含有多少活菌。
板(3)平板选择菌落计数时一般选菌落数在
的平,计数公式为
。
统计菌落数目的方法
(1)显微镜直接计数法
①原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。
②方法:用计数板计数。
③缺点:不能区分死菌与活菌。
(2)间接计数法(活菌计数法
①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②操作
a.设置重复组:同一稀释度下,至少涂布3个平板作为重复组,才能增强实验的说服力与准确性。分析结果时,需考虑重复组的结果是否一致,结果明显不一致,意味着操作有误,需要重新实验。
b.为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。
③计算公式:每克样品中的菌株数=C/V×M,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积/mL,M代表稀释倍数。
3.设置对照
(1)对照实验:是指除了
以外,其他条件都相同的实验。
(2)主要目的:排除实验组中
对实验结果的影响,提高实验的可信度。例如为了确认培养基是否被杂菌污染,需以
培养基培养作为空白对照。
4.设置对照结果分析与评价
内容
现象
结论
对照的培养皿中无菌落生长
有无杂菌污
染的判断
培养物中菌落数偏高
未被杂菌污染
被杂菌污染
菌落形态多样,菌落培养物中混入其他杂数偏高
选择培养基
的筛选作用
样品的稀释
操作
重复组的结果
牛肉膏培养基上的菌落数目大于选择培养基上的数目
得到三个或三个以上菌落数目在30~300的平板
选择培养基具有筛选操作成功
若选取同一种土样,统计结果应接近
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